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低温生物的影响因素有哪些

菌的质量：保藏的应培养在营养丰富的条件下，使之进入稳定期，稍老一些的菌体对环境抵抗力强。另处，作为冷冻干燥的菌悬液细胞浓度要高不同的菌对冷冻干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液细胞浓度不高，就会使以后传种造成困难，保存期也会受到影响。

保护剂：不同种类的保护剂对不同微生物的作用是不同的，如个别在脱脂乳作保护剂的情况下失败率高达99.99%，而采用葡聚糖等混和保护剂时失败率大大减少。一般情况下，那些容易保存的对保护剂的要求不很严格，而不易保存的对保护剂的要求却很苛刻。因此，选择好的保护剂是冷冻干燥保存的关键因素。

干燥速度：实验表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率为67.3%，而3h为59%。

空气的影响：冷冻干燥后空气对细菌细胞影响较大，可导致细胞损伤进而失败，故在冻干后应立即在真空下融封，才有利于长期保存。

温度的影响：在干燥和真空状况下温度的影响远没有上述几项因素重要，因此可以在室温下保存，但许多微生物在4℃保存的存活率要比在室温下高1倍。

含水量的影响：水分含量过高对菌存活不利，完全脱水也不利于保存，一般把干燥后的细胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

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低温生物的保存方法有哪些？

（一）培养基保存法

利用各种斜面和半固体培养基，加上石蜡油保存，是一种简易的保存方法。

1.普通琼脂斜面保存法：肠道菌、等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上，斜面底部应加少许无糖肉膏汤，以防干涸。经35℃培养18～24h后，移种于4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次。

2.血液琼脂斜面保存法：链球菌、应接种于血液琼脂斜面上，35℃培养生长后，置4℃冰箱中保存，链球菌须半个月至1个月移种一次，新分离菌株须2～4天移种一次，以后逐渐延长移种时间，在适应后可延至半个月移种一次。

3.巧克力色斜面保存法：宜保存菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移种一次。

4.鸡蛋斜面保存法：适于保存含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌，一般可保存一个月。

5.半固体穿刺保存法：将细菌接种于琼脂半固体或琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。

（二）干燥保存法

原理是将细菌体内的水分蒸发掉，使其处于休眠和代谢停滞状态，从而达到长期保存的目的医|学教|育网搜集整理。干燥后低温保存，可保存数年至十几年。

（三）冷冻干燥保存法

本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于保存的因素（低温、干燥和缺氧等），是目前有效的保存方法之一。用本法保存的具有成活率高，变异性小等优点，保存期一般3～5年，有的可长达10年以上。

（四）脱脂牛奶保存法

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                                                          低温生物的筛选

对水中氮的有机物去除起主要作用的是氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌，它们适宜温度多为30～35℃，但是对于北方寒冷地区来说，偏低的水温明显不利于普通氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌发挥其对氮素有机物的去除作用。因此，筛选适用于北方寒冷地区的低温氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌对于北方地区的污水处理有着现实意义。本文提出了一种筛选低温氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌的方法：在15～18℃进行氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌的富集、的分离纯化、初筛、作用效果的测定。通过此一系列步骤从培养基中分离出氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌各6株。